牛蛙心脏实验

本篇下载资源为本实验优秀实验报告示例。

目录

1. 实验原理与基础知识
2. 实验目的
3. 实验对象与器材
4. 关键实验技术
5. 实验过程：1-在体实验
6. 实验过程：2-蛙心离体过程
7. 实验过程：3-离体蛙心实验
8. 注意事项
9. 常见问题
10. 思考题、参考与拓展内容

实验原理与基础知识

一. 蛙类心脏结构特征

两栖类动物的心脏结构与哺乳动物不同，为两心房、一心室结构。心室发出动脉圆锥，自动脉圆锥又发出两条主要动脉左主动脉与右主动脉。直接注入心脏的大静脉共有七条，从前到后分别为左右前腔静脉、左右肺静脉、左右肝静脉与后腔静脉，它们交汇处的膨大结构称为静脉窦，静脉窦与心房连接，其中含有心脏的主要起搏点。静脉窦处节律细胞的自动节律性最高，心房处次之，心室处最低。

二. 心肌生理基础

心肌也属于可兴奋组织，可以产生动作电位，并产生机械收缩。与神经与骨骼肌若干毫秒时程的动作电位不同，心肌的动作电位时程普遍较长，长达数百毫秒。这是因为心肌动作电位常常具有一个较长的平台期，期间膜电位从较高的水平缓慢下降，相当一段时间内几乎保持在同一水平，形态与神经或骨骼肌短促尖锐的峰电位截然不同。在平台期间，质膜上转运钙离子的离子通道开放，诱使钙离子跨膜内流，进一步触发肌质网（肌细胞中特化的滑面内质网）膜表面上钙释放通道的开放，导致大量钙离子进入胞质，与心肌当中的收缩机制结合，诱发肌肉收缩。这一过程称为钙诱导的钙释放，是心肌电兴奋触发机械收缩的基本机制。

平台期间膜电位较高，心肌细胞膜上负责起始动作电位的钠通道持续处于失活状态，导致心肌动作电位的不应期也长达数百毫秒，其中绝对不应期基本对应整个收缩期和舒张早期，而相对不应期位处舒张期内。很长的不应期使得心肌难以发生强直收缩，有助于维持心脏正常搏动的节律。

另外，一些心肌生理的资料（例如下图）中有着有效不应期的概念，包括狭义上的绝对不应期，和另一个称为局部反应期的时期。在狭义的绝对不应期间，任何大小的刺激都无法导致膜电位产生有生物学意义的变化；在局部反应期间，足够强大的刺激可以诱发短暂、小幅度的膜电位变化（所谓的“局部反应”），但这一膜电位改变无法像动作电位那样不衰减地扩布，也不能诱发真正的动作电位。

本文提及的绝对不应期为广义上的绝对不应期，定义为任何强度的刺激都无法诱发动作电位的时期，与有效不应期等同。书写实验报告时统一称呼即可，最好明确标出采用的定义。

值得一提的是，上文描述的主要是心房和心室中工作心肌的动作电位形态，心脏中其他类型的组织可具有不同的动作电位形态，例如起搏细胞和一部分传导细胞的动作电位并不具有平台期。相关内容不在此处赘述，有兴趣者可自行了解。

心脏中的起搏细胞可自发产生相对规律的电信号激动心脏，使得心肌按一定频率周期性地舒缩。如果在一次电活动的不应期之后、起搏细胞产生下一个信号之前向心脏发放一个额外刺激，就有可能触发一次提早的收缩活动，称为期前收缩。期前收缩期间心脏的电活动与正常时无异，因此期前收缩也具有自己的不应期，而如果起搏细胞产生的下一个信号恰好落入期前收缩的绝对不应期，此次正常心搏便不能产生，需要再等待起搏细胞的一个周期才能产生正常心搏。这就使得期前收缩和下次正常心搏之间出现一个较长的间隔，称为代偿间歇。

三. 离子与药物对心脏的影响：机理

心肌的电活动与机械收缩都与环境中各类无机离子强烈相关，改变环境中的离子含量可对心脏活动产生明显的影响。

钠离子：与神经与骨骼肌类似，心肌动作电位的起始高度依赖于钠离子的内流，若细胞外钠离子含量过低，心肌动作电位的升支将受到抑制，而在细胞外无钠离子时无法起始动作电位。与之相对的是，除非浓度过高以致强烈影响渗透压，通常胞外高钠对心脏活动影响不显著。

钾离子：钾离子的持续跨膜外流是形成心肌静息电位的基础，细胞外钾的含量对心肌的生理活性具有极显著的影响。如果细胞外钾离子升高，钾离子内高外低的浓度梯度减小，外流趋势下降，静息电位上升，导致钠通道失活比例上升，膜兴奋性下降，强烈抑制收缩，甚至可出现心脏停搏。

若希望详细了解胞外高钾对心脏影响的机制，请参考专业生理学教材中关于静息电位形成机制的部分。

钙离子：如前所述，心肌的收缩高度依赖于细胞外钙离子的内流。当细胞外钙含量过低时，进入细胞内的钙离子不足，使得与收缩机制结合的钙离子也减少，结果心肌的收缩力将削弱；事实上，心肌在不含钙离子的溶液中将停止收缩。而当细胞外钙含量升高时，进入细胞的钙离子增加，心肌收缩将增强。细胞外高钙较轻微时，可以观察到心脏收缩力的增加；细胞外钙浓度明显升高时，心肌可进入持续收缩的状态，张力维持在较高的水平，这一现象称为钙僵直。如果持续时间太长，由于对心肌组织本身造成损伤，钙僵直甚至可能不可逆。

细胞外高钙还可影响心肌细胞膜的兴奋性，同时对其他细胞生理活动造成影响，钙僵直以及期间的组织损伤并不仅仅出于上文提及的原因。

同时，为适应不断变化的生理需求，心脏具有多种神经递质与激素的受体，可对生理条件下即存在的化学信使以及多种药物作出反应。

肾上腺素受体：心脏的起搏细胞和心肌都含有β肾上腺素受体，可被去甲肾上腺素、肾上腺素等化学信使激活。它的激活整体上起到兴奋心脏的作用，可以增强心肌收缩力、加快起搏细胞的节律、加速电信号在心脏组织中的传导，可大幅提高心输出量，有利于在应激状态下满足机体提高的代谢需求。特异阻断β受体的药物，如普萘洛尔等，可抑制这些化学信使的作用。

乙酰胆碱受体：心脏当中分布的乙酰胆碱受体多为M型乙酰胆碱受体，可被乙酰胆碱激活。乙酰胆碱对心脏的作用以抑制为主，它可以抑制心肌收缩、减慢起搏细胞的节律、抑制电信号在心脏组织中的传导，减少心输出量。在动物体内，支配心脏的副交感神经释放的神经递质通常是乙酰胆碱，负责在机体休息，代谢需求降低时下调心脏的活动，有助于降低能耗，避免循环系统压力过大。特异阻断M受体的药物，如阿托品等，可抑制乙酰胆碱的作用。

值得一提的是，乙酰胆碱和细胞外高钾都可以对心脏产生显著的抑制作用，但其机制与表现都有所不同。

• 在心脏中，M受体相对集中地分布在起搏细胞和传导系统上，乙酰胆碱对这两种组织的抑制更为显著，特别是可以产生强烈的降心率作用，往往可以观测到心率的一过性降低。实验期间，可仔细留意加入乙酰胆碱使心搏曲线刚刚出现变化后，心搏的间隔是否出现了一过性的延长。
• 细胞外高钾直接影响膜电位，广泛、非特异性地抑制心脏当中所有可兴奋组织（包括起搏细胞、传导系统与心肌）的兴奋性，阻断兴奋的生成和扩布。它也可以抑制起搏细胞的活动，但它对工作心肌兴奋和收缩的直接抑制更为显著，一般不会观察到明显的心率下降。

感兴趣的话，可以在实验期间或实验结束后，仔细观察对比这两种条件处理的心搏曲线。

实验目的

• 学习暴露牛蛙心脏的方法，熟悉心脏的结构，辨认主要的大血管。
• 观察心脏各部分自律性活动的时相和频率特点，掌握在体蛙类心脏活动的描记方法。
• 观察额外刺激对心脏收缩的影响，了解其产生机理。
• 学习离体蛙心的制备及其灌流方法。
• 观察钙、钾等离子，去甲肾上腺素、乙酰胆碱、普萘洛尔、阿托品等药物对心脏活动的影响。

实验对象与器材

• 牛蛙（Lithobates catesbeiana），蛙类手术器械，蜡盘，蛙心夹，张力换能器，生理信号采集处理系统，任氏液，塑料滴管，棉球，铁支架，双凹夹，大头针，刺激电极

• 八木氏套管，包括动脉插管（下图中A）与静脉插管（下图中B），蛙心灌流架，万能滑轮

  

• 任氏液，4% CaCl₂，4% KCl，0.1%去甲肾上腺素（NE），0.01%乙酰胆碱（ACh），0.1%普萘洛尔，0.1%阿托品

  如果实际使用的药物浓度与此处不一致，务必记录实际浓度。

关键实验技术

• 牛蛙心脏暴露法
• 在体蛙类心脏活动的描记方法
• 牛蛙离体心脏的制备
• 牛蛙心脏插管技术

实验4 蛙类心室的期前收缩与代偿间歇（在体）

首先用双毁髓术处死牛蛙，方法同前实验中所述。

一. 暴露心脏

• 剪开胸部皮肤

  将牛蛙背位置于蜡盘上。用镊子提起胸骨后方腹部的皮肤，用手术剪剪开一个小口，由开口处向左右两侧锁骨外侧方向（下颌角方向）剪开皮肤，将皮肤掀向头端。

• 剪开胸部肌肉及相关骨骼

  用镊子提起胸骨后方的腹肌，剪开一个小口，沿皮肤切口方向紧贴胸壁剪开腹部肌肉，注意勿伤及心脏与血管，必要时剪断左右乌喙骨和锁骨，使创口呈倒三角形。

• 剪开心包膜

  用眼科镊提起心包膜，用眼科剪小心剪开，暴露心脏。

• 心脏结构观察

  胸面观：可见牛蛙心脏的一个心室、两个心房、左右主动脉。

  背面观：用蛙心夹夹住少许心室尖端肌肉，将心室翻向头侧，可见位于两个心房下端与之相连的静脉窦，仔细辨认还可发现心房和心室之间有一黄色界限称为房室沟，心房与静脉窦之间有一条白色半月形界限称为窦房沟。

  观察静脉窦、心房、心室的搏动顺序。

二. 记录过程

• 标本与实验仪器的连接

  在牛蛙心室壁末端用蛙心夹夹住少许心肌，将心脏倒置提起，用棉线通过大头针将蛙心夹与张力换能器相连，张力换能器的另一端与记录系统1通道相连。

  将刺激电极安放在心室外壁，使之既不影响心搏，又能同心室密切接触，电极另一端与记录系统刺激输出相连。

• 正常心搏曲线描记

  打开实验软件，选择期前收缩－代偿间歇实验 ￫ 取消刺激器界面的“触发捕捉”￫ 开始示波 ￫ 开始记录 ￫观察记录正常心搏曲线，仔细观察曲线各波与心脏各部位活动之间的关系。

• 期前收缩与代偿间歇的测定

  选择能引起心脏发生期前收缩的刺激强度（一般在2~5V，宜低不宜高），在心室收缩期和舒张期的早、中、晚期分别给予单刺激，记录心搏曲线的变化情况。

  找出心室收缩的绝对不应期（有效不应期）、相对不应期、超常期，以及期前收缩与代偿间歇。

  有时候期前收缩不容易诱发，可能是因为心肌不应期本就较长，加之实操时刺激发放的实际时刻与操作者的预期之间存在延迟，刺激很容易落进不应期内。可以快速多试若干次，至少触发一次期前收缩，实验结束后再仔细观察。

实验5 离体蛙心的制备

• 清视野

  将胸腺、心包膜、动脉膜、肝系膜去除干净，辨认心脏结构及9条重要血管的位置。必要时使用金冠剪多剪除一些胸部组织，注意不要伤及心脏。

• 血管结扎（重点！）

  结扎右主动脉：在右主动脉下穿过两根线，分别结扎，中间剪断。

  总结扎线：左右肝静脉和左右肺静脉之间穿双线，其中一条线的一端自左主动脉下方，向动物胸腔左上方穿出，另一端在动物胸腔左上方打一个松结，将心室拉至胸腔右下侧，当心房收缩上提时于胸腔左上侧位置结扎。将两侧前腔静脉、左右肺静脉结扎在内，从结扎线以外剪断。注意远离静脉窦。

  【特别提示】

  总结扎线的线头结扎后，由于血管受到刺激、压力改变等原因，心率可能一过性下降。这是正常的，无需过分担心，可在心脏上滴加任氏液，等待一段时间，观察心率是否恢复如前。如果心率能够肉眼可见地明显恢复，说明结扎位置正确，可继续进行后续操作。

  如果心率一直较慢（通常会降至结扎前的50%）且观察不到明显的恢复，则说明有可能不慎结扎到了静脉窦。此时应将心脏拉起，观察结扎线位置，如果确实位置过于接近静脉窦，请尽快将结扎线打开（如果还未系紧）或剪断（如果已经系紧），用任氏液润湿心脏，等待一段时间，待心率有所恢复后，再尝试打一次总结扎线。注意，只要及时发现并去除结扎线，一次甚至几次结扎到静脉窦不会对标本状态以及后续实验产生影响。万一出现误操作，请不要过于担忧，以作者本人的经验而言，此处的容错率相当高。

• 插管

  左肝静脉插管：在左右肝静脉和后腔静脉下穿线（与总结扎线同时穿入），打一个松结，在左肝静脉远心端沿向心方向剪开一个楔形切口（大小约为管径的1/2），将装满灌流液的静脉插管（粗管）插入左肝静脉，见蛙心膨胀变白后结扎线扣。用灌流液将心脏内血液完全洗出。

  确认灌流液可以由静脉插管进入心脏后，再进行后续操作。

  左主动脉插管：在左主动脉弓下穿双线，远心端结扎固定，近心端线先打一个松结，在动脉管壁远心端两线之间沿向心方向剪一个楔形切口（大小约为管径的1/2），插入动脉插管（细管），见有灌流液流出后结扎线扣，并固定于插管侧面的突起上。注意动脉插管不要插太深，以免插入动脉圆锥。

• 心脏离体与安放

  剪除插管外与心脏相连的其他组织，游离心脏。先固定蛙心灌流架，再将离体心脏安放于蛙心灌流架上。调整灌流液液面及动脉插管出口的高度，使灌流液既能在心脏收缩时顺利搏出心脏，又能形成循环。

  如果由于心脏收缩力度不够等原因，按照灌流架上的接法不能让灌流液从动脉插管出口流出再回到静脉插管，可以令动脉插管出口自然下垂，让灌流液自然流出（使用废液缸承接），并注意及时向静脉插管补充损失的灌流液。

  

  无论采取哪种方法（特别是第二种）搭建灌流装置，都务必仔细观察动脉插管出口，确保有灌流液持续、节律性地流出后，才能进行各种后续实验。如果灌流液流出不通畅，流出量逐渐减少，或几乎不流出，则说明灌流装置内部不够通畅，这将显著影响心脏收缩的情况（通常会导致心脏收缩逐渐减弱，收缩曲线振幅持续下降），并且干扰药物的进入。关于如何排查解决灌流不畅的问题，请参见常见问题一节。

• 标本与仪器连接

  用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖部，蛙心夹上的棉线通过万能滑轮转换后与张力换能器相连。将张力换能器固定在蛙心灌流架的上方。张力换能器数据端接记录系统1通道。

实验6 离子和药物对离体蛙心的影响

【重要提示1】每次实验前都请按上节最后所述的方式检查灌流系统是否通畅，如有不畅尽快处理，否则无法获得有意义的实验结果！

【重要提示2】提前设置好记录系统上的标签，做好标记，以免影响后续实验数据的分析。

【重要提示3】每次更换灌流液时，确保静脉插管中的液面保持一致。

• 离子对心脏活动的影响

  打开软件→选择蛙心灌流实验→开始示波→开始记录→记录一段正常心搏曲线。

  向静脉插管内任氏液中滴加4%CaCl₂2滴，快速吹洗混匀。观察到心搏出现变化后，立即将灌流液全部吸出，用新鲜任氏液换洗2~3遍后，在静脉插管内注入新鲜任氏液，使心脏恢复正常搏动。

  滴加4%CaCl₂6滴，快速吹洗混匀，观察心搏出现变化后立即换洗。

  滴加4%KCl 1~2滴，快速吹洗混匀后观察心搏出现变化后立即换洗。

• 药物对心脏活动的影响

  首先记录正常心搏曲线。

  滴加0.1%去甲肾上腺素1滴，快速吹洗混匀后观察心搏情况，出现变化后立即换洗；

  滴加0.1%普萘洛尔1滴，混匀，约1min后滴加0.1%去甲肾上腺素1滴，混匀后观察心搏变化，与前一步进行比较后，立即换洗；

  滴加0.01%乙酰胆碱1滴，混匀后观察心搏出现变化后立即换洗；

  滴加0.1%阿托品1滴，混匀，约1min后滴加0.01%乙酰胆碱1滴，观察心搏变化，与前一步进行比较后，立即换洗。

注意事项

• 经常用任氏液润湿心脏，防止干燥。
• 倒三角形创口不要太大，尽量不要暴露肺和肝脏，剪胸骨和肌肉时要紧贴胸壁，以免损伤心脏和血管。
• 提起和剪开心包膜时要仔细，避免损伤心脏。
• 蛙心夹夹住心尖部不宜过多，以防损伤心室。蛙心夹与张力换能器之间的连线松紧要适宜，既能清楚记录心搏曲线，又不能伤及心室。
• 每次刺激后，必须等待心搏恢复正常后再给予下一次刺激。每一次刺激前都要有正常搏动曲线作为对照。
• 制备蛙心标本时，勿伤及静脉窦。心脏插管时，切勿戳穿心壁及血管壁。随时用任氏液润湿蛙心表面。
• 各种液体滴管要专用，不可混用。每加一种溶液要用滴管混匀，以免所加溶液浮在上面，不易进入心脏。
• 蛙心插管内液面应保持一定高度，以1.5cm为宜。
• 张力换能器应高于蛙心灌流架并略向下倾斜，以免液体进入换能器。
• 滴加试剂后，一旦出现变化应立即用新鲜任氏液换洗2~3次，以免心肌受损，而且必须待心脏恢复正常后方能进行下一步实验，以形成前后对照。
• 滴加药品和换取新鲜任氏液时，须及时标记，以便观察分析。
• 化学药物作用不明显时，可再适量滴加，密切观察药物剂量添加后的实验结果。

常见问题

一. 在体实验部分

1. 期前收缩死活诱发不出来，怎么办？

   先确定心脏表面与电极接触的部分是否残留有结缔组织，确保结缔组织去除干净，并保持电极与心脏的接触面湿润。如果刺激强度较低，先试着增加刺激强度。如果刺激强度已经很大却仍不成功，可以试着在不注意观察曲线的情况下，手动快速多次随意发放若干次刺激（也就是随便多点几次鼠标），察看这若干次刺激是否成功触发期前收缩。因为如上文所述，心肌的不应期本就很长，加之凭借肉眼观察曲线确定刺激时间可能不准确，有可能诱发不成功仅仅是因为每次刺激都刚好落入不应期。

   此外，如果心脏收缩曲线振幅及频率较低或不稳定，也可能与心脏状态不佳有关，可用任氏液洗涤并静置一段时间后再行刺激。

二. 离体实验部分

【重要提示】不要随意破坏或结扎未辨认清楚的血管！对于任何操作或预期外的现象，有疑问时都最好先咨询老师或助教。

【特别说明】蛙心离体过程中操作较复杂精细，感觉困难是正常情况。以作者本人踩了无数坑却依然得到了很好的实验结果的经历为证，这部分的容错率其实很高，无论是否对自己的技术信心充足，至少可以对标本抱有足有的信心。

1. 如何确认总结扎线打对了？

   提前说明：第一次操作很难保证总结扎线一次打对位置，强烈建议在打上第一个结后先仔细观察、等待一段时间，确保位置基本没问题之后，再打第二个结完成结扎。这样即使失误了也能迅速解开结再来一次，否则就会像作者一样不得不拿剪刀把结剪开。

   仔细观察心脏跳动情况。如果总结扎线位置正确，结扎后等待一段时间，心脏的跳动即会基本恢复正常，与结扎前差异不大。也可提起心脏，观察总结扎线与静脉窦的位置，如果总结扎线基本没有触及静脉窦，同时心跳基本正常，即可放心进行下一步实验。

   不必过于谨慎，标本功能是判断操作正误的金标准，具体的位置要求未必那么严格。

2. 打完总结扎线后心脏突然停跳了，怎么办？

   结扎之后，由于心脏受到刺激，一过性的停跳属于正常现象，只要没有一直停就可以。但如果心脏恢复跳动后心率始终较结扎前慢，没有回升的趋势，或甚至一直不复跳，则有可能是结扎到了静脉窦。此时也不要惊慌，可将心脏提起查看结扎线位置，如果确实扎到了静脉窦，请立即去除结扎线（解开或剪开），用任氏液润湿心脏，等待一段时间，通常心脏状态可以逐渐恢复。待心脏恢复后，即可重新尝试结扎。

3. 静脉插管后，灌流液未进入心脏或进入不畅

   先调整插管口与心脏之间的角度。如果无效，检查插管是否插入过深或误插入静脉夹层。若不确定，可以多尝试几次。

4. 动脉插管后无灌流液流出或流出不畅

   首先使动脉插管自然下垂，观察灌流液是否流出。如果此时灌流液可以持续正常流出，说明标本的收缩力不足以形成循环，但这不会影响后续实验，保持动脉插管的位置、注意补充静脉插管中的液体即可。

   如果未缓解，检查动脉插管整体有无阻塞，以及是否误入动脉夹层。动脉壁较厚，误操作插入夹层的可能性更高，如有必要，可用眼科剪小心扩大动脉上的切口。

   如果插管本身正常，观察静脉插管和动脉插管的管口与心脏的夹角，注意是否有因角度问题而造成堵塞的可能。特别是挂上蛙心灌流架后，蛙心重量的影响可能会使插管角度发生变化，需要多次尝试、重新调整。

   此外，如果前期实验中打上总结扎线和静脉插管之间的间隔太长，也有可能会遇到一种较少见的情况：心脏内部形成血栓，而血栓也可能影响灌流液循环。此时可以用手小心按压蛙心，尝试将血栓排出心脏。此操作强烈建议寻求老师或助教帮助。

   再次温馨提示：灌流通畅的标志是有灌流液持续、稳定、周期性地从动脉插管口流出，同时心脏收缩曲线稳定。任何实验都务必在确认灌流通畅的情况下进行，否则心脏的收缩力将受到影响，且药物无法充分与心脏接触，将无法得到有意义的实验结果。

5. 心脏挂上灌流架后一直漏液，怎么办？

   先检查插管（主要是动脉插管）本身是否漏液。如果插管完整，仔细检查插管口与心脏大血管，观察是否有连接不紧或管口损坏的情况。必要时可以重新结扎，或更换插管再行结扎。

   如果漏液不至于影响心脏跳动，实验结果一般不会受到显著影响。只需要持续补充静脉插管的任氏液，也可考虑在滴加药物时酌情增加用量，弥补因漏液损失的药物。

6. 加入钾或乙酰胆碱之后，心脏一下子停跳了，怎么办？

   钾离子和乙酰胆碱都有较强的抑制作用，最好不要一次滴加太多。滴加后心脏一过性停跳是正常现象，立即换洗后观察心脏逐渐恢复即可。

   偶尔，心脏可能无法快速恢复。此时可以在确保灌流通畅的情况下手动按压心脏，通常可以使其逐渐恢复跳动。此操作强烈建议寻求老师或助教帮助。

7. 蛙心搏动变化的实验现象和理论不符，怎么办？

   首先检查有没有加错药物。如果药物无误，确认滴加药物时有无吹吸混匀，如果确实忘记此步操作，应在更换灌流液后再进行一次实验。如果依然现象不显著，检查灌流是否通畅，特别注意心脏的收缩曲线有无振幅递减的情况，这是灌流不畅的一个重要标志。

   此外，如上所述，如果心脏漏液明显，可能会有大量药物因漏液损失，而使现象不显著。此时可酌情增加药物用量，观察现象。

思考题、参考与拓展内容

一. 思考题

• 设计实验，观察刺激强度、刺激时间对期前收缩幅度的影响。
• 如何证明心脏节律性的起搏点及兴奋传导顺序。
• 设计一个新的、更简单的离体心脏插管方法。
• 设计一个兔心离体灌流的方法。
• 设计一个实验，用于了解某种药物对心房肌收缩力与节律的影响。
• 用此标本还可以做哪些实验？

二. 参考资料

1. 生理学实验指导.魏香、谢佐平、苏付荣，编著.清华大学出版社，2005.
2. 生理学实验指南. 项辉、龙天澄、周文良，主编.科学出版社，2008.
3. 生理学实验（第四版）.谢景田、刘燕强、崔庚寅，主编.高等教育出版社，2016.
4. 生理学（第二版）. 姚泰，主编. 北京：人民卫生出版社，2010.